? ? ? ?來源：藥學速覽 ▉ 導讀 圖片來源：cytivalifesciences ? ? ? ?雙特異性抗體（Bispecific antibody，BsAb)，一般來講是指一種可以特異性結合兩個抗原或者同一個抗原的兩個不同表位的抗體。今天，我們來簡單的瀏覽一下關于雙抗的那些知識，主要從構型以及作用機制和未來趨勢三大塊來介紹。 ▉ 雙特異性抗體的構型 ? ? ? ?雙抗構型（format)，主要分為三大類： ? ? ? ?第一類是由抗原結合區域（Fab）組裝起來的融合蛋白，可以避免輕重鏈錯配等問題，同時由于不含有糖基化修飾的Fc段，可以使用相對簡單的原核或者低等的哺乳動物細胞來進行生產，高產且成本低。不含Fc段的缺點也是顯而易見，由于無法與FcRn結合，在血漿中很快被清除，半衰期非常短，還有穩定性和易聚集也是開發時需要考慮的問題。目前，該構型有一款雙抗（Blinatumomab) 已上市。 structure of BsAb(圖中圈出的為上述介紹中的第一類構型) 圖片來源：biying ? ? ? ?第二類是對稱型，在裸抗基礎上融合抗體片段，對稱型雙抗在分子量和結構上與裸抗有區別，這有可能會導致穩定性及可溶性等問題。對稱型雙抗一般是采用四價2+2。這種抗體兩個抗原結合位置由于挨得比較近，可能會影響兩個靶點同時靠近，導致效價降低，對于這種分子可能后期還需要進行優化。 structure of? BsAb (2+2) 圖片來源：biying ? ? ? ?第三類是非對稱型構型，也是目前大多數藥企為盡可能保留天然抗體性質在開發時采用的構型。這種構型模仿天然抗體，缺少非天然的抗體結構域或者linker，被認為是免疫原性最低的構型。通常，非對稱型雙抗是二價1+1，也就是抗體以單價形式結合2個抗原，這種構型的雙抗約占50%，其中1款Emicizumab已上市，一款上市后由于商業化原因退市(cartumaxomab)，另有多個處于在臨床不同開發階段。 structure of? BsAb (1+1) 圖片來源: biying structure of BsAb: a mechanistic revies of the pipeline, Nature Reviews, 2019 Bispecific antibodies: a mechanistic review of the pipeline ? ? ? ?TIPS：什么是效價（valency）？ ? ? ? ?效價指抗體分子中抗原結合位點的數量。雙特異性抗體構型的設計會影響每個靶標的結合位點數量。每個靶標具有一個結合位點的二價bsAb表示為1+1。摻入其他結合位點可導致三價（2+1）和四價（2+2或1+3）設計。 antibody format, biying Bispecific antibodies: a mechanistic review of the pipeline ▉ 雙特異性抗體的作用機制 ? ? ? ?目前雙抗的作用機理主要包括兩大類：橋接兩種細胞類型（in-transbinding）和結合一個細胞的兩個分子（in-cisbinding）。目前雙抗主流的治療領域主要分為抗腫瘤、自身免疫病及其他疾病三類，其中以抗腫瘤產品居多，而CD3T細胞銜接子雙抗又占了雙抗的半壁江山。 
Examples of obligate mechanisms of action of bsAbs. 橋連細胞——T細胞招募 ? ? ? ?最初雙抗就是用于T細胞重定向的，利用雙抗橋連T細胞與腫瘤細胞，通過結合TCR復合物中的CD3e使T細胞可以繞開MHC分子直接活化，活化后的T細胞通過釋放穿孔素，顆粒酶等殺傷腫瘤細胞。盡管這種想法在體外已經被驗證，但是卻沒有持續的臨床效果。由于并發癥以及雙抗本身不穩定，后續雙抗開發受阻。在此不得不提到安進的blinatumomab，該抗體的出現極大的推動了整個領域的發展。該雙抗是單鏈抗體，不含Fc段，僅有55kDa，血漿半衰期1.25±0.63小時。當通過連續靜脈注射達到低谷水平時，NHL病人顯示出較好的響應，對于復發及難治ALL，其完全緩釋率達到43%。 影響T細胞殺傷的因素，主要分為幾個，腫瘤靶點與T細胞的距離將直接影響免疫突觸的形成，而這與T細胞最終在體內進行有效殺傷直接相關。二價的靶點結合由于提高了對靶點結合的親和力，可以增強T細胞對腫瘤的殺傷，目前羅氏有一款1+2雙抗，在I期臨床展示出非常好的效果。這種雙抗在設計時，應充分考慮到CD3一端的親和力，過高的親和力會讓雙抗占住細胞CD3的抗原，持續活化該細胞，最終導致T細胞耗竭，而低親和力會使雙抗不斷與不同細胞的CD3結合并解離，與T細胞的反復結合產生瀑布效應可以使T細胞成簇，最終導致大量的T細胞活化，最終殺傷腫瘤細胞。另外，CD3親和力過高，會讓雙抗更集中在脾臟等組織，從而難以抵達腫瘤組織，相當于分散了火力。 Bi-specific T-cell engager，wikipedia 
treatment effect: 1( antibody for cancer cell)+1(antibody for T cell)>2 ? ? ? ?結合雙抗原表位的雙抗：不同于結合兩個不同抗原的雙抗，這種雙抗則是選擇結合同一個抗原不同的兩個抗原表位，通過抗原交聯和聚集增強結合強度，從而模仿抗體混合物和多克隆抗體的效果。目前國內百濟神州引進的雙抗ZW25（Zanidatamab）就是這種作用機制，通過結合兩個非重疊的HER2表位可以雙重阻斷HER2信號、增強結合并去除細胞表面的HER2蛋白、強有力的抗體效應子功能，以加強在患者中的抗腫瘤活性。 ? ? ? ?模擬輔因子：羅氏一款雙抗便是通過模擬輔酶因子（FVIII），將酶（FIXa)與底物（FX）拉近，從而使酶對底物進行活化，最終形成活化的底物，用來治療因為FVIII缺失而造成凝血障礙的罕見病A型血友病。該藥2017年于美國上市，可以有效地減少血友病的出血量及出血頻率。由于該藥作為預防性治療，年治療費用高達40萬美元，目前上市僅四年，銷量就達到了24億美元，國外機構預測2022年，年銷售達45億美元。 (https://link.springer.com/article/10.1007/s12185-018-2545-9；Emicizumab, a humanized bispecific antibody to coagulation factors IXa and X with a factor VIIIa-cofactor activity) ▉ 已上市或在III期臨床中的雙特異性抗體 ▉雙特異性抗體未來發展趨勢 ? ? ? ?展望未來，許多處于發展初期有前途的概念已嶄露頭角。 ? ? ? ?1、 IGM Biosciences公司借助帶有J鏈（例如IgM和IgA）抗體類的自然結構，在J鏈上連接了效應細胞靶向臂，這樣就可以組裝成1+10的雙抗，目前已有一款雙抗處于臨床I期階段，其中14人中有9人腫瘤明顯縮小,展示出了比較好的臨床效果。 ? ? ? ?2、 另外一個比較新穎的雙抗概念是，遞送mRNA，DNA到體內轉錄后表達雙抗，均在動物體內展示出較好的腫瘤清除。在工業制備上，mRNA和DNA的生產要比蛋白更快，這極可能會加速新雙抗的臨床開發。尤其是DNA相對于mRNA或者抗體蛋白，不僅生產成本低，穩定性高，對于長期保存及運輸提供了極大便利。這種定向的雙抗DNA遞送可用于抗病毒、細菌感染，極有可能成為病毒疫苗的安全替代品。 ? ? ? ?3、 另外一種新概念則是給溶瘤病毒或者CAR-T加裝雙抗或者受體蛋白，達到靶向遞送，并在腫瘤微環境中發揮功能。 ? ? ??如涉及知識產權請與我司聯系
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